國家梗稻工程技術中心用精米機加工留胚米
概況：以留胚米Z601為原料，利用發芽過程使精米中γ一氨基丁酸積累。通過單因素實驗、響應面實驗得到了精米中GABA含量與浸泡溫度、浸泡時間、發芽溫度、發芽時間4 種發芽條件回歸模型，確定了對GABA含量積累最有利的發芽工藝條件為浸泡溫度31 'c、浸泡時間、發芽溫度31 'c、發芽時間27h ，此條件下精米中GABA 含量為3 1.1 3mgl10飩，是不發芽條件下的4倍。
目前，水稻中GABA含量的研究主要原料是糙米，糙米的口感影響人們的消費。Z601是一種高胚率的米，其精米留肝率在80%以上。本研究以Z601 為原料，通過精米機等儀器進行實驗，響應面實驗研究精米中GABA 含量與漫泡溫度、浸泡時間、發芽溫度、發芽時間4 種發芽條件的關系，為留胚精米的綜合利用和新產品的開發提供理論參考。
材料與儀器
材料
留胚米Z601 國家梗稻工程技術中心；γ- 氨基丁酸 Sigma-Aldrich CoLLC；三氯乙酸、次氯酸鈉、醋酸鈉。天津市北方天醫化學試劑廠；甲醇(色i譜純)、乙睛(色譜純) Merck KGaA Darmstadt Germany；硫基乙醇 AMRESCO Inc；鄰苯二甲醛 生工生物(上海)工程有限公司。
儀器
高效液相色譜儀LC- lO ATVP：日本島津公司 Venusil MP-C" 色譜柱(4.6mm x 250mm) ；
TE214S 電子天平：賽多利科學儀器有限公司；
LTJM-2099精米機：杭州麥哲儀器有限公司；
;pHS-3C型pH計：天津盛邦科學儀器技術有限公司；
HYG恒溫搖床：上海欣蕊自動化設備有限公司；
HK-02A粉碎機：廣州旭朗機械設備有限公司；
SI-fB-3 型循環水式多用真空泵：鄭州長城科工貿有限公司；
針式過濾器：天津博納艾杰爾科技有限公司；
一次性使用無菌注射器( lmL)：上海治寧醫療器械有限公司。
實驗方法
1.2.1 精米發芽工藝條件及操作要點工藝流程:原
料篩選→去皮成糙米→磨成精米→泊'毒→清洗→發芽→干燥→粉碎。
操作要點:選取籽粒飽滿的稻米，去皮后用LTJM-2099精米機處理40s成為精米。為了抑制發芽后的發酵昧，用1%的次氯酸鈾水榕液洗lmin，用滅菌的去離子水反復沖洗3遍。將處理好的精米用紗布包好，恒溫浸泡，轉入培養皿中發芽，保持培養溫潤，每到上下翻動一次。發芽結束后將培養且放入55CC烘箱終止活性，干燥一定時間，取出粉碎。
1.2.2 GABA含量測定
樣品準備:將粉碎后的樣品過60目篩，稱取2g加入5%三氯乙酸水榕液5mL，30℃振蕩提取2h，離心(轉速10000r/min)lOmin，取上清液待測。
色譜條件:單泵，流速為0.9mL/min; 色譜柱為Venusil MP-C" (4.6 x 250mm) ，柱溫30 "C ;流動相為1.6g NaAc .3H2O榕于600mL水中，pH7.2 甲醇200mL，乙氧200mL；檢測波長338nm。
衍生化；吸取棚酸緩沖液(O.4mol/L，pH10.4)1000μL，樣品200μL，OPA 衍生試劑(OPA 80mg，β- 琉基乙醇80μL ，乙睛10mL) 200μL ，淚合均勻，暗室中室溫反應5min后進樣20μL。
GABA標準曲線的繪制：用配制好的250mg/L的標準液分別稀釋50、40、30、20、10、6、5倍，柱前衍生，吸取20μL進樣，重復三次，以GABA的濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。
