食品蛋白質(zhì)測(cè)定的利器—蛋白質(zhì)測(cè)定儀
1材料與方法
1.1試劑和儀器濃硫酸、40%氫氧化鈉溶液、2%硼酸溶液、5%硫酸銅溶液、10%硫酸鉀酸性溶液、0.1mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。B-324蒸餾裝置、K-424定氮儀消化系統(tǒng)BUCH、電位滴定儀等。
1.2樣品處理取待測(cè)固體樣品0.2~1.0g或液體樣品5~10ml,置消化管中;加4ml濃硫酸,10ml10%硫酸鉀溶液,1ml5%硫酸銅溶液,輕輕搖勻后置于加熱儀上消化。先用小火消化15min,再用強(qiáng)火消化45min,直至溶液澄清透明,冷卻后待測(cè)。
1.3樣品蒸餾將消化冷卻后的樣品消化液通過儀器進(jìn)行蒸餾。儀器蒸餾條件為:40ml蒸餾水,20ml40%氫氧化鈉,50ml2%硼酸,蒸餾時(shí)間為3min。
1.4樣品滴定蒸餾液在電位滴定儀上用0.1mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至終點(diǎn)(pH=4.6)。
1.5結(jié)果計(jì)算X=(V1-V0)@C@F@0.014@100m式中:X為試樣中蛋白質(zhì)含量(g/100ml或g/100
g);V1為試樣消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液的體積(ml);V0
為試劑空白消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液的體積(ml);C為鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液濃度(mol/L);F為氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù);m為試樣的質(zhì)量或體積(g或ml)。
用蛋白質(zhì)測(cè)定儀檢測(cè)食品中的蛋白質(zhì),簡(jiǎn)單方便快捷,結(jié)果準(zhǔn)確可靠,避免了傳統(tǒng)方法消化時(shí)對(duì)人體可能造成的危害和滴定時(shí)個(gè)人操作間的差異以及顯色劑帶來的誤差。本實(shí)驗(yàn)操作過程中應(yīng)注意下列問題:催化劑的用量不宜過多,否則會(huì)使消化液冷卻后凝集成塊,不利于蒸餾。若消化時(shí)加入硫酸量過多,會(huì)增加氫氧化鈉的消耗量;加入過少,會(huì)導(dǎo)致消化不完全,因此應(yīng)注意硫酸用量的適當(dāng)。在配制硫酸鉀溶液應(yīng)充分?jǐn)嚢枋沽蛩徕浤芡耆芙狻Ｔ诓僮鲗?shí)踐中,要摸索比較適合本實(shí)驗(yàn)室的理想實(shí)驗(yàn)參數(shù),并選擇理想的蒸餾條件。
