食品蛋白質測定的利器—蛋白質測定儀
1材料與方法
1.1試劑和儀器濃硫酸、40%氫氧化鈉溶液、2%硼酸溶液、5%硫酸銅溶液、10%硫酸鉀酸性溶液、0.1mol/L鹽酸標準溶液。B-324蒸餾裝置、K-424定氮儀消化系統BUCH、電位滴定儀等。
1.2樣品處理取待測固體樣品0.2~1.0g或液體樣品5~10ml,置消化管中;加4ml濃硫酸,10ml10%硫酸鉀溶液,1ml5%硫酸銅溶液,輕輕搖勻后置于加熱儀上消化。先用小火消化15min,再用強火消化45min,直至溶液澄清透明,冷卻后待測。
1.3樣品蒸餾將消化冷卻后的樣品消化液通過儀器進行蒸餾。儀器蒸餾條件為:40ml蒸餾水,20ml40%氫氧化鈉,50ml2%硼酸,蒸餾時間為3min。
1.4樣品滴定蒸餾液在電位滴定儀上用0.1mol/L鹽酸標準溶液滴定至終點(pH=4.6)。
1.5結果計算X=(V1-V0)@C@F@0.014@100m式中:X為試樣中蛋白質含量(g/100ml或g/100
g);V1為試樣消耗鹽酸標準滴定液的體積(ml);V0
為試劑空白消耗鹽酸標準滴定液的體積(ml);C為鹽酸標準滴定液濃度(mol/L);F為氮換算為蛋白質的系數;m為試樣的質量或體積(g或ml)。
用蛋白質測定儀檢測食品中的蛋白質,簡單方便快捷,結果準確可靠,避免了傳統方法消化時對人體可能造成的危害和滴定時個人操作間的差異以及顯色劑帶來的誤差。本實驗操作過程中應注意下列問題:催化劑的用量不宜過多,否則會使消化液冷卻后凝集成塊,不利于蒸餾。若消化時加入硫酸量過多,會增加氫氧化鈉的消耗量;加入過少,會導致消化不完全,因此應注意硫酸用量的適當。在配制硫酸鉀溶液應充分攪拌使硫酸鉀能完全溶解。在操作實踐中,要摸索比較適合本實驗室的理想實驗參數,并選擇理想的蒸餾條件。
