定氮儀對黑豆營養物質的提取與分析

　　1.引言

　　黑豆系被子植物，豆科，一年生作物。種皮為黑色的大豆稱為黑豆。大豆原產中國，種質資源豐富，全國共搜集保存大豆22000 多份，其中黑豆2980 份，占全部大豆種質資源的13.2%[1,2,3]。黑豆在全國各地都有栽培，尤以山西、河北、陜西栽培最多。民間老百姓主要將黑豆作為飼料來喂養牲畜，認為人食用后不易消化，在山西北部用來加工豆腐等。

　　大豆生長過程中除了形成高蛋白質、高脂肪外，還能形成一類次生代謝物異黃酮，它在抗癌方面具有重要作用。實驗還證明異黃酮可殺死兒童B 細胞先兆白血病和成人急性白血病的所有細胞[4,5,6,7]。但目前對黑豆的營養價值、營養成分以及開發利用的研究工作很少有報道。近年來，在日本黑豆的系列產品開發很多[8,9]，已經成為中老年人預防與功能食品的一種重要選擇。在我國，隨著研究工作的深入，黑豆將會成為一種高級功能食品。

　　2.試驗方法

　　2.1 供試材料、試劑與儀器及計算方法

　　2.1.1 原料：黑豆為山西省離石、平遙、長治、靜樂、河曲與神池等地采集六個品種，對比分析所用為離石本地品種

　　2.1.2 試劑：無水乙醇、乙醚、四氯化碳均為分析純；硫酸（比重1，84）、硒粉（催化劑）、甲基紅+溴甲酚綠（染色劑）、蘆丁、薯蕷皂標準品。

　　2.1.3 儀器：JJ—2 型組織搗碎機、DF—101 集熱式恒溫加熱磁力攪拌器、DLSB—5/40 型低溫冷卻液循環泵、RE—52AA 旋轉蒸發器、SHB—ⅢA 循環水式多用真空泵、UV—1200 紫外可見分光光度計、S2F—06A 型脂肪測定儀、 D2F--#型真空干燥箱、TD18 電子分析天平、 KDN-04A全自動定氮儀、7230G 可見分光光度計。

　　2.1.4 計算方法：

　　（1）薯蕷皂、蘆丁的計算方法：

　　提取率（%）=（測量值×稀釋倍數×定容量/樣品重）×100

　　粗含量（%）Cx=（AxCs/As）×100

　　Cx 為樣品的濃度（mg/mL） Cs 為標準溶液的濃度（mg/mL）

　　Ax 為樣品的吸光度（Abs） As 為標準溶液的吸光度（Abs）

　　（2）粗蛋白的計算方法：

　　粗蛋白含量（%）=（V-Vo）×0.014×A×100/W

　　V—消耗氯化氫的毫升數 V0—空白實驗時消耗氯化氫的毫升數

　　N—氯化氫的當量濃度 0.014—1ml 氯化氫的克當量數

　　A—固定系數 W—樣品重量

　　（3）粗脂肪的計算方法：

　　準確稱取 抽取 虹吸 烘干 稱重所得

　　（4）總糖測定的計算方法：

　　含糖量（%）=c×10-6×1000/m=c/m

　　2.2 實驗方法和過程：

　　將黑豆搗碎、烘干、研磨成粉末，用TD18 電子分析天平稱量一定量的粉末樣品。

　　2.2.1 薯蕷皂、蘆丁的測定：

　　準確稱取各樣品一式三份，用65%的乙醇浸泡24 小時，然后用旋轉蒸餾的方法進行濃縮、烘干干燥，析出深黃色的蘆丁和白色的薯蕷皂藥膏；用65%的乙醇稀釋、過濾、定容至5ml 容量瓶中。將定容后的溶液取5ml 稀釋定容至50ml 容量瓶,以65%乙醇溶液作參比,用紫外可見分光光度計測得其吸光度并進行計算。

　　2.2.2 蛋白質測定

　　將樣品過篩， 準確稱取各地樣品一式三份 加入少許硒粉與10 毫升硫酸，在消化爐中進行消化40 分鐘 然后在定氮儀中進行蒸餾（具體操作略），最后用0.1 摩爾的氯化氫滴定，記錄滴定所用氯化氫毫升數，按照公式計算蛋白質含量。

　　3 結論

　　隨著定氮儀對對黑豆品種的進一步研究、這將對黑豆粗加工、深加工提供了科學的依據；為將來黑豆系列的食品與功能食品的研究與開發指明了方向。